蘇木色精 用途與合成方法
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概述 |
天然染料蘇木精是從南美的蘇木（Haematoxyloncampechianum）干枝中用乙醚浸制出來的一種色素，是最常用的染料之一。含有3分子結(jié)晶水，在100～120℃溶于本身的結(jié)晶水中。在水溶液中，特別是在堿溶液中易被空氣氧化成紅棕色的氧化蘇木精。蘇木精不能直接染色，必須暴露在通氣的地方，使他變成氧化蘇木精（又叫蘇木素）后才能使用，這叫做“成熟”。 蘇木精的“成熟”過程需時較長，配置后時間愈久，染色力愈強(qiáng)。被染材料必須Chemicalbook經(jīng)金屬鹽作媒劑作用后才有著色力。所以在配制蘇木精染劑時都要用媒染劑。常用的媒染劑有硫酸鋁按、鉀明礬和鐵明礬等。蘇木精是淡黃色到銹紫色的結(jié)晶體，難溶于冷水和乙醚和甘油，易溶于熱水和熱酒精，溶于堿、氨和硼砂的溶液，是染細(xì)胞核的優(yōu)良材料，他能把細(xì)胞中不同的結(jié)構(gòu)分化出各種不同的顏色。分化時組織所染的顏色因處理的情況而異，用酸性溶液（如鹽酸—酒精）分化后呈紅色，水洗后仍恢復(fù)青藍(lán)色，用堿性溶液（如氨水）分化后呈藍(lán)色，水洗后呈藍(lán)黑色。 |
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蘇木精-伊紅染色 |
蘇木精-伊紅染色又稱“蘇木素-伊紅染色“、“HE染色”，是組織學(xué)最常用的染色方法之一。HE染色是一種以形態(tài)為基礎(chǔ)，結(jié)合應(yīng)用化學(xué)技術(shù)對組織、各種細(xì)胞進(jìn)行染色的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，用于研究組織細(xì)胞的生理、病理和化學(xué)結(jié)構(gòu)。 基本原理：去氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中稱藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結(jié)合使胞漿染色，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對比。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料。 一般染色組織切片厚度為3μm左Chemicalbook右，中樞神經(jīng)系統(tǒng)6～8μm，腎小球基底膜染色觀察時要求1.5～2μm標(biāo)準(zhǔn)厚度。 染色結(jié)果：細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)色。細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被伊紅Y染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對比。 這種染色方法的基礎(chǔ)是組織結(jié)構(gòu)對不同染料的結(jié)合程度不同。染料蘇木精可以將嗜堿性結(jié)構(gòu)染成藍(lán)紫色，而伊紅可以將嗜酸性結(jié)構(gòu)染成粉紅色。嗜堿性結(jié)構(gòu)通常包括含有核酸的部分，如核糖體、細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)中富含核糖核酸（RNA）的區(qū)域等。嗜酸性結(jié)構(gòu)則通常由細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，如路易體（Lewybody）、酒精小體（Mallorybody）、細(xì)胞質(zhì)的大部分等。有時，黃褐色也會出現(xiàn)在染色樣本中，這是由于組織內(nèi)原有的色素，例如黑色素等造成的。 |
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Harris蘇木素液 |
配方： 蘇木精1g 無水乙醇10ml 蒸餾水200ml 鉀明礬20g HgO0.5g 先將蘇木精溶于無水乙醇中，備用。把明礬放入蒸餾水，加熱溶解，再加入備用的蘇木精，煮沸2分鐘，先加入極少量的氧化汞（紅色、黃色均可），防止氧化過程中液體劇烈沸騰外溢（最好選用比配制容積大一倍燒杯，燒杯比三角燒瓶更不容易外溢），玻棒攪拌，然后，邊攪拌邊加入氧化汞。一定要注意開始時只能一點(diǎn)點(diǎn)加，直到液體不再劇烈沸騰了，才能增加加入的量，直至加完。加入氧化汞所用的時間Chemicalbook和氧化汞溶解的程度、電爐的功率是此配方的關(guān)鍵，也是各人配出來染色效果各不相同的原因，具體要根據(jù)每人的習(xí)慣進(jìn)行調(diào)整，同時也要根據(jù)氣溫而適當(dāng)改變加熱的時間，加熱時間越長，氧化越快。加完后，立即移至冰水中，加速其冷卻，靜置一夜后，過濾。用前以5%的比例加入冰乙酸。如配好后時間較長，冰乙酸的量可適當(dāng)多加一點(diǎn)。冰乙酸的量，可直接影響蘇木素的著色能力和清晰度。加少了，會造成核漿共染，背景不干凈；加多了，核著色能力下降。此液可放置3月至半年左右。 |
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Gill改良蘇木素液 |
配方： 蘇木精2g 無水乙醇250ml 硫酸鋁17.6g 蒸餾水750ml 碘酸鈉0.2g 冰乙酸20ml 先將蘇木精溶于無水乙醇,硫酸鋁溶于蒸餾水,然后兩液混合后加入碘酸鈉,最后加入冰乙酸。此液為半氧化進(jìn)行性蘇木素液，不會產(chǎn)生沉淀，氧化膜少，從理論上說染色不需要分化，但如果適當(dāng)深染分化，染色效果更好。配制此染液的關(guān)鍵在于碘酸鈉的量。一、要根據(jù)季節(jié)氣溫的改變，適當(dāng)調(diào)整Chemicalbook碘酸鈉的量，配方里碘酸鈉的量一般只適用于夏天，隨著氣溫降低，氧化速度降低，可適當(dāng)增加碘酸鈉的量，要注意應(yīng)該從0.05g開始一點(diǎn)點(diǎn)增加，過量的碘酸鈉可使蘇木素過氧化，不僅容易壞，而且核漿共染。二、稱量一定要準(zhǔn)確，很多單位配此染液總是染不上或染的很慢，主要是天平的精確度差，最好選擇最小稱量度在10mg以下的天平。三、應(yīng)該觀察碘酸鈉是否在有效期內(nèi)，是否潮解。 |
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Ehrlich蘇木素液 |
配方： 蘇木精2g 無水乙醇100ml 甘油100ml 冰乙酸10ml 鉀明礬2-3g 蒸餾水100ml 先將蘇木精溶于無水乙醇，加甘油和冰乙酸待用。然后Chemicalbook把鉀明礬溶于蒸餾水，再注入待用的蘇木精液，用玻棒攪勻，輕蓋瓶口（可用棉花），置于日光下，經(jīng)常開啟瓶口并搖勻，約二個月后，顏色變褐色即可使用。 |
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Mayer改良蘇木素液 |
配方： 蘇木精2g 無水乙醇40ml 硫酸鋁鉀100g 蒸餾水600ml 碘酸鈉0.4g 稍加熱將硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中，同時將蘇木精溶無水乙醇,再將二液混合Chemicalbook，加入碘酸鈉，充分溶解。此液也是進(jìn)行性蘇木素液，從理論上說染色不需要分化，但如果適當(dāng)深染分化，染色效果更好。注意事項(xiàng)與Gill改良蘇木素液相同。 |
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用途 |
是染細(xì)胞核的優(yōu)良材料，他能把細(xì)胞中不同的結(jié)構(gòu)分化出各種不同的顏色。分化時組織所染的顏色因處理的情況而異，用Chemicalbook酸性溶液（如鹽酸—酒精）分化后呈紅色，水洗后仍恢復(fù)青藍(lán)色，用堿性溶液（如氨水）分化后呈藍(lán)色，水洗后呈藍(lán)黑色。 用作核和染色質(zhì)的染色劑；用于定性檢定銅(II)、鐵(III)、鉬酸鹽、鉍(III)和錫(IV)等；用于光度法測定釩、Chemicalbook鋁、錫(IV)、氟、鈮、鉭等。墨水制造；用作酸堿指示劑,pH5.0(黃)～6.0(紫)、0.0(粉紅)～1.0(綠)。 核和染色質(zhì)的染色劑。定性檢定銅(II)、鐵(III)、鉬酸鹽、鉍(III)和錫(IV)等。光度測定釩、鋁、錫Chemicalbook(IV)、氟、鈮、鉭等。墨水制造。酸堿指示劑,pH5.0(黃)～6.0(紫)、0.0(粉紅)～1.0(綠)。 |
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